[摘要] 目的:觀察MEBO(含100%MEBO,以下簡稱MEBO)對燒傷常見細菌變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌的作用。方法:將上述細菌接種在普通瓊脂培養基上,并在接種的細菌表面涂上一層MEBO,置37℃,20h~22h觀察。結果:MEBO使上述細菌的形態結構發生變異。與在含25%MEBO和含50%MEBO的培養基上細菌形態變異現象相比較,無論細菌形態變異出現的時間和形態變異的特點都有明顯差別。結論:MEBO具有較強的抗菌作用。
[關鍵詞] MEBO 細菌 形態變異 血漿凝固酶
已有實驗報道觀察了變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌在含有25 %MEBO和50%MEBO培養基上形態結構等特性的變異現象。本實驗是模擬臨床燒傷病人創面涂抹一定厚度MEBO的用藥方法而設計的。實驗觀察了MEBO使上述細菌發生形態變異的現象,比在含25%MEBO和含50%MEBO培養基上的形態變異現象出現得早,形態變異特點也有差別,進一步驗證了MEBO的抗菌作用。
材 料 和 方 法
1. 材料
MEBO: 北京光明中醫燒傷創瘍研究所研制。菌種:大腸桿菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌(由本室提供)、綠膿桿菌(由濱州醫學院附屬醫院院檢驗科提供)。營養瓊脂:北京市海淀區微生物培養基制品廠。
2. 實驗方法
制備普通瓊脂培養基。將上述4種細菌分別密集劃線接種于普通瓊脂培養基上。接種細菌的面積約5cm×3cm。再將擠出的MEBO放于培養基中未接種細菌的部位,分別用無菌的取菌環取MEBO以密集劃線法涂布于已接種細菌的表面。然后,將培養基置37℃培養箱。20~22h為一代進行傳代,傳10~15代。每代細菌都在涂抹MEBO的細菌處2~3個不同部位取菌涂片、染色,觀察形態變化。做金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗,觀察綠膿桿菌色素變化。
3. 檢測指標
(1) 觀察MEBO對變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等形態結構的影響。
(2) 對上述4種細菌在MEBO和在含25%MEBO、50%MEBO培養基上細菌的形態結構、變異特點進行比較。
結 果
1. MEBO對4種細菌形態變異的影響
(1) MEBO對變形桿菌形態變異的影響(見表5-10-1)
37℃,20~22h培養后進行觀察比較。實驗結果表明MEBO對上述4種細菌在導致形態變異,使綠膿桿菌色素消失,和使金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產生能力減弱等方面都比25%MEBO和50%MEBO的作用顯著,而且出現早,形態變異的特點也有差異。實驗結果與以前報道的不同濃度的MEBO的抗菌作用是一致的。MEBO的藥效是與MEBT配合時產生的。
從表5-10-1~4中還可以看出,將每種細菌具有共同形態變異特點的歸為一組,這是較粗的分組,因為細菌在MEBO的作用下,傳代的代數不同,以及同一代的細菌接觸MEBO的量的多少不同,在形態變異方面是有差別的。上述細菌發生形態結構的變異現象,說明了細菌的代謝和生理等特性的改變與它所處的環境有密切關系。
多種細菌均能在沒有基因改變的情況下發生形態結構等方面的變異。這種非遺傳性變異到目前為止除對誘導酶所引起的變異了解得比較深入外,其他變異現象的發生機制尚不十分清楚。但有充分證據說明分裂是受復制的控制。從上面現象也說明,細胞分裂對MEBO藥物非致死因子作用的敏感性,比蛋白質、DNA、RNA合成和膜的形成更敏感,導致形成長桿菌和多核絲狀細胞。這種非遺傳性變異在適宜條件下經過一段時間可以恢復。但上述桿菌在MEBO的作用下連續傳代,最后形成比原代菌小的桿菌或近似圓球形的細菌,多數細菌菌體可見著色深的顆粒。說明細菌在MEBO環境中最終導致了細菌的代謝合成速度減慢,影響了細菌生長繁殖速度。又如金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產生明顯減弱,這些都能影響細菌的毒性作用。
實驗結果進一步說明了MEBO比含25%MEBO和含50%MEBO的抗菌作用都強。至于上述細菌變異現象的產生機制尚須深入探討研究。
(曲云英等)